Post Icon



Качество эмбрионов для переноса классификация


Классификация эмбрионов для переноса

Шанс успешного ЭКО зависит от многих факторов, важнейшим из которых является качество эмбриона. Эмбрионы плохого качества реже имплантируются в матку, значит шансы наступления беременности могут значительно снижаться.

Качество эмбрионов зависит от биологического материала и профессионализма врача. Поэтому очень важно внимательно выбирать клинику и ответственно подходить к рекомендациям врача в период подготовки к ЭКО.

Для выявления качества эмбрионов в процессе ЭКО существует специальная классификация. По ней врач оценивает состояние бластоцист и выбирает, какие лучше перенести в полость матки. Рассмотрим, какого качества бывают эмбрионы, как они формируются и приживаются.

Содержание

  • 1 Формирование
  • 2 Категории
  • 3 Перенос

Формирование

В момент оплодотворения сперматозоидом яйцеклетка превращается в зиготу. Оплодотворения могут проводить в пробирке, либо при помощи вспомогательных методов ИКСИ и ПИКСИ.

В течение первых 24 часов зигота пытается делиться и в конце концов она раздваивается и образуются бластомеры. Уже на этом этапе врач может выбрать качественные эмбрионы, которые не отстают в развитии. Если зигота делится слишком медленно, то это является признаком нарушения.

Эмбрион продолжает активно дробиться, пока не образуется 8 бластомер. На этом этапе могут сформироваться однояйцевые близнецы. Как только бластомеры перестают дробиться, эмбрион превращает в морулу. Следующим этапом внутри эмбриона образуется полость и эмбрион продолжает дробиться, он превращается в бластоцисту из 16 и более клеток.

На этапе бластоцисты зародышу необходимо прикрепиться в полости матки, чтобы начать питаться от организма матери и продолжить расти. Такое состояние наступает на 5 день после оплодотворения.

Категории

При культивации эмбрионов врач производит условную оценку бластоцист. Это помогает выбрать самые качественные клетки для дальнейшей подсадки. Врач оценивает степень зрелости, внутриклеточную массу и толщину наружного слоя. Выставляя оценку из одной цифры и двух букв соответственно.

Рассмотрим, что означают эти цифры и буквы.

1 — не зрелая, полость составляет половину объема;

2 — бластоциста не больше, чем дробящийся эмбрион;

3 — бластоциста намного больше дробящегося эмбриона, полость большая;

4 — полость занимает всю бластоцисту, она начинает пробиваться через оболочку;

5 — бластоцисты продолжает разрывать оболочку;

6 — бластоциста без оболочки.

Первая буква А характеризует содержимое клетки, то есть ту массу, из которой будет в дальнейшем формироваться ребенок:

А — качественная, клеток много;

В — относительно качественная, имеет небольшие отклонения;

С — наблюдаются серьезные нарушения;

D — очень плохое качество бластоцисты.

Вторая буква описывает состояние внутриклеточной оболочки, от которой в последствии будет зависеть процесс прикрепления плода к стенке матки.

А — отличное качество, слой состоит из большого количества клеток;

В — есть небольшие отклонения, например, клеток меньше, либо они располагаются в два слоя;

С — клеток мало, слой плохого качества;

D — очень плохое качество слоя.

Таким образом, можно сделать вывод, что самый качественный эмбрион будет с обозначением 4АА и 5AA. Допустимы к подсадке все бластоцисты, кроме самых плохих и незрелых, который по определению не смогут имплантироваться.

Перенос

Перенос эмбрионов может проводиться не только на 5 сутки на стадии бластоцисты. В некоторых случаях может быть рекомендован более ранний перенос — на 3 сутки.

Культивирования эмбриона до стадии бластоцисты позволяет выбрать максимально качественные клетки, так как многие из них погибают в искусственных условиях. Подсадка качественных эмбрионов увеличивает шанс наступления беременности.

Но если женщина уже несколько раз неудачно прошла ЭКО с пятидневными бластоцистами, ей может быть рекомендован перенос трехдневных эмбрионов. Возможно, что им будет легче развиваться в естественных условиях и они выживут, сформировав здорового ребенка.

Стоит отметить, что классификация эмбрионов при ЭКО не является приговором. Даже если были получены эмбрионы плохого качества, беременность все равно может наступить. Часто врачи встречаются с ситуацией, когда женщина не может забеременеть с первоклассными бластоцистами. Но при переносе эмбрионов 3 класса беременность успешно наступала и рождался здоровый ребенок.

1ivf.info

Культивирование эмбрионов - что это? Фото и Видео

Многим бесплодным парам врачи рекомендуют применять процедуру культивирования. Что такое культивирование эмбрионов – это один из вопросов, который будет обсуждаться в данной статье.

Культивирование

Начало культивирования зародышей происходит на следующий день после забора фолликулов. Врачом-эмбриологом производится оценка качества эмбрионов при ЭКО. Затем соединяются женские и мужские половые клетки, через некоторое время врач рассматривает под микроскопом скорость деления биоматериала.

Дата переноса бластоцист назначается в зависимости от количества биоматериала. Классификация эмбрионов по качеству при ЭКО определяется сутками.

Культивирование эмбрионов – это один из этапов ЭКО, поддерживающий жизнедеятельность зародыша перед их подсадкой в матку.

Зигота помещается в жидкость, схожую по температурному режиму и составу в маточных трубах. Создается подобная жидкость в лабораторных условиях. Чтобы клетки не погибли раньше времени, они постоянно находятся под присмотром медицинского персонала.

Какого качества бывают эмбрионы:

  1. 2 сутки – при этом контуры бластомеров четкие, форма – правильная, высокая способность имплантации;
  2. 3 сутки – бластомеры и цитоплазмы неровные, нормальная способность имплантации;
  3. 4 сутки – удовлетворительная способность имплантации;
  4. более 4 суток – неудовлетворительная способность имплантации.

Чтобы выбрать самые жизнеспособные зародыши, стараются использовать как можно больше яйцеклеток.

Качество

5 клеточный эмбрион считается нормой и достаточно часто применяется в медицинской практике. Для того, чтобы процедура ЭКО прошла успешно, обязательно проводится культивирование гамет. Качество эмбрионов для переноса при ЭКО зависит от многих факторов.

От чего зависит качество эмбрионов при ЭКО:

  1. экология;
  2. вредные привычки;
  3. наличия заболевания половых органов;
  4. иммунная система;
  5. лишний вес;
  6. несбалансированное питание;
  7. стрессовые ситуации;
  8. гормональные сбои.

Классы эмбрионов в ЭКО говорят о качестве биоматериала, от которого зависит исход процедуры.

Качество эмбрионов и их классы тесно связаны друг с другом. Существует 4 класса:

  • класс А – полностью отсутствую безъядерные фрагменты;
  • класс В–не более 20% безъядерных фрагментов от общего объема;
  • класс С – содержание ануклеарных фрагментов от 21% до 50%;
  • класс D – содержится более 50% безъядерных фрагментов, категория не используется для дальнейшего проведения процедуры.

Фрагментация эмбриона при ЭКО чаще всего говорит о каких-либо генетических нарушениях со стороны женских или мужских репродуктивных органах.

Классы

На сегодняшний день оценка качества зародышей происходит по количеству клеток, а также степени фрагментации.Если в карте ставится: эмбрионы 8а — это значит, что зигота содержит 8 клеток, а фрагментация полностью отсутствует. Также учитывается равномерность дробления, наличие вакуолей и отсутствие ядерных бластомеров.

Эмбрион bl1 – это маленькая бластоциста, качество которой на данном этапе оценить очень трудно. Имплантация дает положительные результаты в том случае, если хорошо развита внутренняя клеточная масса бластоцисты и трофобласт.

Эмбрион 4аа класса – это хорошее качество бластоцисты, имплантируется с вероятностью более 70%. Первая проверка качества зародыша происходит через 48 часов после изъятия яйцеклетки для проведения ЭКО. Оплодотворение яйцеклеток и качество зиготы оцениваются в первый день после подсадки.

Таблица — Качество эмбрионов для переноса

Зародыши выбирают по следующим критериям:

  1. степень фрагментации;
  2. качество;
  3. однородность и форма клетки;
  4. время деление клетки;
  5. отсутствие цитоплазмы.

Для проведения ЭКО оставляют только самые сильные зародыши для проведения.

Протокол культивирования

Протокол культивирования эмбрионов по дням проводится для того, чтобы выбрать более сильные зародыши.

Развитие зародышей происходит следующим образом:

  • 1 день – проводится пункция;
  • 2 день – клетки начинают делиться, при нормальном развитии должно быть от 2 до 4 бластомер;
  • 3 день – здоровые клетки продолжают делиться, бластомеров уже от 6 до 8;
  • 4 день – клетки разделяются на 10-16 бластомеров;
  • 5-6 день – бластомеры превращаются в бластоцисты, что увеличивает шансы имплантации.

Самые лучшие среды для культивирования эмбрионов считается та, которая близка к среде жидкости, находящейся в маточных трубах. В каждом отдельном случае проводится индивидуальное культивирование эмбриона в естественном цикле, так как у каждой женщины сроки овуляционного цикла свои.

Расшифровка протокола производится исключительно врачом-эмбриологом на основании формы, цвета, размера бластоцисты. Лаборант ежедневно проводит исследование каждого зародыша и вносит отметку в карту. Такой подход помогает выбрать самый подходящий образец для подсадки в маточные трубы будущей матери.

Противопоказания

ЭКО не имеет противопоказаний, однако, при внутриматочном введении эмбриона существуют некоторые факторы, при которых данную процедуру проводить не рекомендуется.

К противопоказаниям относятся:

  • опухоли различной этиологии;
  • фиброма;
  • нарушения функций репродуктивных органов;
  • отсутствие матки;
  • инфекционные заболевания;
  • воспалительные процессы;
  • обострения хронических заболеваний.

Если ЭКО несколько раз подряд не дает положительных результатов, это значит, что есть проблемы с яйцеклетками или сперматозоидами. В таком случае врачи советуют выбрать другой получения биоматериала, например, ИКСИ. Процедура подразумевает введение сперматозоида в цитоплазму ооцита.

Какой бы метод оплодотворения не использовался, часть материала останется непригодной. Одни зародыши быстро погибают, прекращая свой рост, другие имеют неподходящий генотип. По статистике в лучшем случае пригодны лишь 68% образцов. Культивирование помогает увеличить шанс прикрепления зародыша к матке. При хорошей подготовке приживается до 95% бластоцист.

ekoclinic.ru

Эмбрион 4 бб. Классификация эмбрионов при проведении процедуры эко

Начало культивирования зародышей происходит на следующий день после забора фолликулов. Врачом-эмбриологом производится оценка качества эмбрионов при ЭКО. Затем соединяются женские и мужские половые клетки, через некоторое время врач рассматривает под микроскопом скорость деления биоматериала.

Дата переноса бластоцист назначается в зависимости от количества биоматериала. Классификация эмбрионов по качеству при ЭКО определяется сутками.

Культивирование эмбрионов – это один из этапов ЭКО, поддерживающий жизнедеятельность зародыша перед их подсадкой в матку.

Зигота помещается в жидкость, схожую по температурному режиму и составу в маточных трубах. Создается подобная жидкость в лабораторных условиях. Чтобы клетки не погибли раньше времени, они постоянно находятся под присмотром медицинского персонала.

Какого качества бывают эмбрионы:

  1. 2 сутки – при этом контуры бластомеров четкие, форма – правильная, высокая способность имплантации;
  2. 3 сутки – бластомеры и цитоплазмы неровные, нормальная способность имплантации;
  3. 4 сутки – удовлетворительная способность имплантации;
  4. более 4 суток – неудовлетворительная способность имплантации.

Чтобы выбрать самые жизнеспособные зародыши, стараются использовать как можно больше яйцеклеток.

Качество

5 клеточный эмбрион считается нормой и достаточно часто применяется в медицинской практике. Для того, чтобы процедура ЭКО прошла успешно, обязательно проводится культивирование гамет. Качество эмбрионов для переноса при ЭКО зависит от многих факторов.

От чего зависит качество эмбрионов при ЭКО:

  1. экология;
  2. вредные привычки;
  3. наличия заболевания половых органов;
  4. иммунная система;
  5. лишний вес;
  6. несбалансированное питание;
  7. стрессовые ситуации;
  8. гормональные сбои.

Классы эмбрионов в ЭКО говорят о качестве биоматериала, от которого зависит исход процедуры.

Качество эмбрионов и их классы тесно связаны друг с другом. Существует 4 класса:

  • класс А – полностью отсутствую безъядерные фрагменты;
  • класс В–не более 20% безъядерных фрагментов от общего объема;
  • класс С – содержание ануклеарных фрагментов от 21% до 50%;
  • класс D – содержится более 50% безъядерных фрагментов, категория не используется для дальнейшего проведения процедуры.

Фрагментация эмбриона при ЭКО чаще всего говорит о каких-либо генетических нарушениях со стороны женских или мужских репродуктивных органах.

Классы

На сегодняшний день оценка качества зародышей происходит по количеству клеток, а также степени фрагментации.Если в карте ставится: эмбрионы 8а - это значит, что зигота содержит 8 клеток, а фрагментация полностью отсутствует. Также учитывается равномерность дробления, наличие вакуолей и отсутствие ядерных бластомеров.

Эмбрион bl1 – это маленькая бластоциста, качество которой на данном этапе оценить очень трудно. Имплантация дает положительные результаты в том случае, если хорошо развита внутренняя клеточная масса бластоцисты и трофобласт.

Эмбрион 4аа класса – это хорошее качество бластоцисты, имплантируется с вероятностью более 70%. Первая проверка качества зародыша происходит через 48 часов после изъятия яйцеклетки для проведения ЭКО. Оплодотворение яйцеклеток и качество зиготы оцениваются в первый день после подсадки.

Таблица - Качество эмбрионов для переноса

Зародыши выбирают по следующим критериям:

  1. степень фрагментации;
  2. качество;
  3. однородность и форма клетки;
  4. время деление клетки;
  5. отсутствие цитоплазмы.

Для проведения ЭКО оставляют только самые сильные зародыши для проведения.

Протокол культивирования

Протокол культивирования эмбрионов по дням проводится для того, чтобы выбрать более сильные зародыши.

Развитие зародышей происходит следующим образом:

  • 1 день – проводится пункция;
  • 2 день – клетки начинают делиться, при нормальном развитии должно быть от 2 до 4 бластомер;
  • 3 день – здоровые клетки продолжают делиться, бластомеров уже от 6 до 8;
  • 4 день – клетки разделяются на 10-16 бластомеров;
  • 5-6 день – бластомеры превращаются в бластоцисты, что увеличивает шансы имплантации.

Самые лучшие среды для культивирования эмбрионов считается та, которая близка к среде жидкости, находящейся в маточных трубах. В каждом отдельном случае проводится индивидуальное культивирование эмбриона в естественном цикле, так как у каждой женщины сроки овуляционного цикла свои.

Расшифровка протокола производится исключительно врачом-эмбриологом на основании формы, цвета, размера бластоцисты. Лаборант ежедневно проводит исследование каждого зародыша и вносит отметку в карту. Такой подход помогает выбрать самый подходящий образец для подсадки в маточные трубы будущей матери.

Противопоказания

ЭКО не имеет противопоказаний, однако, при внутриматочном введении эмбриона существуют некоторые факторы, при которых данную процедуру проводить не рекомендуется.

К противопоказаниям относятся:

  • опухоли различной этиологии;
  • фиброма;
  • нарушения функций репродуктивных органов;
  • отсутствие матки;
  • инфекционные заболевания;
  • воспалительные процессы;
  • обострения хронических заболеваний.

Если ЭКО несколько раз подряд не дает положительных результатов, это значит, что есть проблемы с яйцеклетками или сперматозоидами. В таком случае врачи советуют выбрать другой получения биоматериала, например, ИКСИ. Процедура подразумевает введение сперматозоида в цитоплазму ооцита.

Какой бы метод оплодотворения не использовался, часть материала останется непригодной. Одни зародыши быстро погибают, прекращая свой рост, другие имеют неподходящий генотип. По статистике в лучшем случае пригодны лишь 68% образцов. Культивирование помогает увеличить шанс прикрепления зародыша к матке. При хорошей подготовке приживается до 95% бластоцист.

На сегодняшний день оценка качества эмбрионов происходит в основном по морфологии - внешнему облику эмбриона. Морфологических параметров и характеристик эмбриона очень много, однако, основное значение для эмбрионов 2-3 дня развития имеет количество клеток (оно должно соответствовать дню развития), степень фрагментации (объем занимаемый безъядерными кусочками цитоплазмы эмбриона), равномерность дробления (бластомеры - клетки эмбриона на стадии дробления - должны иметь регулярную форму и равные размеры), наличие/отсутствие вакуолей и других включений в цитоплазму, отсутствие мультиядерных бластомеров (ядро клетки поделилось, а цитоплазма отстает).

Вот нормы по количеству клеток (бластомеров) в первые дни развития (день пункции - нулевой) :2 сутки - 2-6 клеток3 сутки - 4-10 клеток

4 сутки - более 8 клеток

Наиболее часто встречается цифро-буквенная классификация по качеству эмбрионов 2-3 дня. Она отражает главным образом степень фрагментации и количество клеток в эмбрионе. Записывается это обычно так: 8А, 4В, 2С и т.п., где цифра означает количество клеток в эмбрионе, а буква - процент фрагментации.

А - фрагментация отсутствуетВ - фрагментация менее 25%С - фрагментация 25-50%

D - тотальная фрагментация, более 50%. Такие эмбрионы не переносят в полость матки и не криоконсервируют.

Классификация бластоцист:

Существует несколько классификаций бластоцист, но все они похожи. (обращаем Ваше внимание на статью: «Перенос бластоцисты» ) Качество бластоцисты определяется тремя основными параметрами - размером (объемом полости бластоцисты), качеством внутренней клеточной массы (клетки, дающие начало всем тканям будущего зародыша) и качеством трофэктодермы (клеток, дающим в последствии начало всем внезародышевым оболочкам - хориону, плаценте. Также отмечается наличие/отсутствие естественного хэтчинга - точечного разрыва оболочки эмбриона и выклева бластоцисты из нее.

Цифрами обозначается размер бластоцисты - стадия ее экспансии.

1 - ранняя, полость около половины объема бластоцисты;

2 - средняя, полость более половины объема, но размер бластоцисты не сильно больше размера дробящегося эмбриона;

3 - экспандированная бластоциста - полость занимает большую часть объема бластоцисты, блестящая оболочка истончена, объем бластоцисты в 2 и более раза превышает объем дробящегося эмбриона;

4 - бластоциста, вступившая в естественный хэтчинг (выклев);

5 - бластоциста в хэтчинге после проведения ПГД;

6 - полностью вылупившаяся бластоциста.

Первая буква обозначает качество внутренней клеточной массы - массы клеток, из которой в будущем будет развиваться сам эмбрион.

А - плотно упакованная, достаточная по размеру ВКМ, хорошо различима, отсутствуют включения, вакуоли, тяжи и пр.;

B - ВКМ хорошо различима, но имеет незначительные дефекты (небольшой объем, неплотно упакована, мало клеток, есть включения и т.п.);

С - ВКМ либо неразличима, либо имеет серьезные нарушения в структуре;

D - дегенеративная ВКМ.

Второй буквой аббревиатуры обозначается качество трофобласта - клеточного слоя полностью окружающего бластоцисту. Впоследствии из него разовьются все внезародышевые оболочки эмбриона, он отвечает за внедрение эмбриона в стенку матки - имплантацию.

А - трофобласт хорошо организован, многоклеточный и однослойный;

В - трофобласт состоит из нескольких слоев клеток, клетки распределены неравномерно либо клеток меньше, чем в норме;

С - трофобласт состоит из небольшого числа клеток, либо имеет включения, вакуоли, тяжи и иные отклонения от нормы;

D - дегенеративный трофобласт.

Как известно ЭКО достаточно сложная и дорогостоящая процедура, которая занимает много времени и средств, но при этом, увы, не гарантирует положительный результат.

Причины неудач могут быть разными и физиологическими, и психологическими. И если с первыми Вам поможет разобраться Ваш врач, то психологические проблемы, как правило, остаются без внимания в процессе подготовки к ЭКО. Однако их влияние на результат очень велико!

Как узнать: не является ли Ваше бесплодие следствием психологических проблем?

Как исключить влияние негативных психологических факторов в процессе ЭКО?

Как увеличить Ваш шанс в ЭКО с психологической помощью?

Ответить на эти вопросы Вам поможет он-лайн диагностика психосоматических причин бесплодия у женщин.По результатам тестирования: выявление психологических барьеров для наступления беременности; рекомендации практикующих психологов.

Оценка качества эмбрионов на сегодняшний день происходит в основном по морфологии - внешнему облику эмбриона. Морфологических параметров и характеристик эмбриона очень много, однако основное значение для эмбрионов 2-3 дня развития имеет количество клеток (оно должно соответствовать дню развития), степень фрагментации (объем, занимаемый безъядерными кусочками цитоплазмы эмбриона), равномерность дробления (бластомеры - клетки эмбриона на стадии дробления - должны иметь регулярную форму и равные размеры), наличие/отсутствие вакуолей и других включений в цитоплазму, отсутствие мультиядерных бластомеров (ядро клетки поделилось, а цитоплазма отстает).

Вот нормы по количеству клеток (бластомеров) в первые дни развития (день пункции - нулевой):2 сутки - 2-6 клеток3 сутки - 4-10 клеток4 сутки - более 8 клеток

Наиболее часто встречается цифро-буквенная классификация по качеству эмбрионов 2-3 дня. Она отражает главным образом степень фрагментации и количество клеток в эмбрионе. Записывается это обычно так: 8А, 4В, 2С и т.п., где цифра означает количество клеток в эмбрионе, а буква - процент фрагментации.А - фрагментация отсутствуетВ - фрагментация менее 25%С - фрагментация 25-50%D - тотальная фрагментация, более 50%. Такие эмбрионы не переносят в полость матки и не криоконсервируют.Записывается это обычно так: 8А, 4В, 2С и т.п.

Классификация бластоцист. Существует несколько классификаций бластоцист, но все они похожи. Качество бластоцисты определяется тремя основными параметрами - размером (объемом полости бластоцисты), качеством внутренней клеточной массы (клтеки, дающие начало всем тканям будущего зародыша) и качеством трофэктодермы (клеток, дающим в последствии начало всем внезародышевым оболочкам - хориону, плаценте. Также отмечается наличие/отсутствие естественного хэтчинга - точечного разрыва оболочки эмбриона и выклева бластоцисты из нее.Цифрами обозначается размер бластоцисты - стадия ее экспансии.1 - ранняя, полость около половины объема бластоцисты;2 - средняя, полость более половины объема, но размер бластоцисты не сильно больше размера дробящегося эмбриона;3 - экспандированная бластоциста - полость занимает большую часть объема бластоцисты, блестящая оболочка истончена, объем бластоцисты в 2 и более раза превышает объем дробящегося эмбриона;4 - бластоциста, вступившая в естественный хэтчинг (выклев);5 - бластоциста в хэтчинге после проведения ПГД;6 - полностью вылупившаяся бластоциста.Первая буква обозначает качество внутренней клеточной массы - массы клеток, из которой в будущем будет развиваться сам эмбрион.А - плотно упакованная, достаточная по размеру ВКМ, хорошо различима, отсутствуют включения, вакуоли, тяжи и пр.;B - ВКМ хорошо различима, но имеет незначительные дефекты (небольшой объем, неплотно упакована, мало клеток, есть включения и т.п.); С - ВКМ либо неразличима, либо имеет серьезные нарушения в структуре;D - дегенеративная ВКМ.Второй буквой аббревиатуры обозначается качество трофобласта - клеточного слоя, полностью окружающего бластоцисту. Впоследствии из него разовьются все внезародышевые оболочки эмбриона, он отвечает за внедрение эмбриона в стенку матки - имплантацию.А - трофобласт хорошо организован, многоклеточный и однослойный; В - трофобласт состоит из нескольких слоев клеток, клетки распределены неравномерно либо клеток меньше, чем в норме; С - трофобласт состоит из небольшого числа клеток, либо имеет включения, вакуоли, тяжи и иные отклонения от нормы;D - дегенеративный трофобласт.Примером может служит Bl1 (у ранних бластоцист еще трудно оценить разные популяции клеток), Bl2AB, Bl3BB, Bl4AC и т.п.

Описание: День 0. Непосредственно после пункции оценивают зрелость полученных ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК). ОКК с прозрачным кумулюсом как правило содержит зрелый ооцит и получает оценку «1-1».При пункции возможно получение зрелых, незрелых, а также дегенеративных и разрушенных яйцеклеток. Точная оценка состояния ооцита возможна только после его очистки перед проведением ИКСИ.

В зрелых, готовых к оплодотворению ооцитах определяется первое полярное тельце. В эмбриологическом протоколе зрелый ооцит обозначают MII.

Если процесс созревания ооцита в фолликуле нарушен или неправильно введен триггер (ХГ), то существует большая вероятность получения незрелых клеток, обозначаемых – MI и GV (Рис.1). Возможна и полная дегенерация ооцита (Deg).

Рис 1. Ооциты, полученные при пункции яичников после удаления кумулюса (денюдации). А - MII, Б – MI, В – GV. Pb – полярное тельце, ZP – блестящая оболочка

Через 18-20 часов после добавления сперматозоидов или ИКСИ (1-е сутки) при нормальном оплодотворении образуются два пронуклеуса. Это предшественники ядер будущих клеток-бластомеров, на которые начинает делиться оплодотворенная яйцеклетка. При правильном оплодотворении оба пронуклеуса четко различимы. В этом случае им присваивают оценку 2pN. Если пронуклеусов не видно, что обычно связано с отсутствием оплодотворения, в протокол записывается 0pN. При неправильном оплодотворении возможно появление нескольких пронуклеусов, что отражается в записи, например 3pN, 6pN и т.д.(Рис2). «Неправильно» оплодотворенные ооциты не пригодны для дальнейшей работы и утилизируются.

Рис 2. Первый день развития in vitro – формирование зиготы и образование пронуклеусов. А – 2pN (нормальное оплодотворение) – два пронуклеуса Б – 3pN (аномальное оплодотворение) – больше, чем два пронуклеуса.

Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение пяти-шести дней. Оценка качества эмбрионов проводится через 40-42 часа (2 сутки), 72-74 часа (3 сутки) и 120 часов (5 сутки) после оплодотворения. Дробление эмбриона должно быть симметричным (получаются бластомеры одинакового размера) и равномерным (все бластомеры претерпевают деление). Для наглядности эмбриологи используют численно – буквенную систему оценки качества, где цифра означает количество бластомеров, а буква их качество. Для обозначения эмбриона хорошего качества используется буквенный индекс «А», среднего «B», низкого «С». Возможны и промежуточные варианты, например АВ, ВА, ВС, СВ, когда сложно дать однозначную оценку (Рис3).

2-й день (4А) 3-й день (8А) 4-й день (comp)

Рис 3. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro и компактная морула на 4-й день развития. Представлены эмбрионы отличного (А) качества. B – бластомер ZP – блестящая оболочка.

Для второго дня культивирования перспективными считаются эмбрионы с четырьмя бластомерами - 4А, 4АВ, 4В. Для третьего - восьмиклеточные (8А, 8АВ, 8В). Эмбрионы плохого качества (ВС, СВ, С) как правило не переносят, оставляют до пятого дня и при формировании нормальной бластоцисты замораживают или переносят в матку. В случае неравномерного дробления (наличия бластомеров разной величины) потенциал эмбриона к имплантации снижен, и обозначается это приставкой «un», например 3Вun. Наличие фрагментов цитоплазмы обозначают «fr», например 8ВСfr (Рис.4). Оценивается и наличие вакуолей. При их визуализации ставится отметка «vac». В норме каждый бластомер несет одно ядро, если хотя бы в одном бластомере визуализируется больше одного ядра, это называется мультинуклеацией (mN) и указывает на значительную вероятность хромосомной патологии данного эмбриона.

Рис 4. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro. Представлены эмбрионы хорошего (ВА, В) и удовлетворительного (ВС) качества. Во втором ряду эмбрионы с неравномерным дроблением (3Bun и 4BAun).

К концу третьих и на четвертые сутки культивирования эмбрион начинает компактизацию (границы его клеток становятся неразличимы) и готовится к образованию бластоцисты. Его клетки могут быть частично (p.comp) или полностью компактизованы (comp) (Рис.5). Обычно оценка эмбрионов на четвертые сутки не проводится ввиду малой информативности данной стадии развития. Однако наличие компактизации на вторые сутки может свидетельствовать об аномальном развитии и обязательно должна отражаться в эмбриологическом протоколе.

Рис 5. Стадия компактизации 4-е сутки культивирования A – p.comp Б - comp

На пятые сутки, примерно через 120 часов после оплодотворения эмбрион образует бластоцисту (Bl) (Рис.6). Оценка качества бластоцист подразумевает ее размер, который отражается цифрами от 1 до 5; состояние внутренней клеточной массы (ВКМ) (от «A» до «С») и окружающих ее клеток – трофобласта (от «а» до «с»). Лучшими для переноса будут бластоцисты размера от 3 до 5, имеющие многоклеточную ВКМ и трофобласт – Bl4Aa, Bl4Ab. Бластоцисты среднего качества обозначаются как – Bl2Bb, Bl3Bb, а плохого – BlCc.

Рис 6. Бластоцисты на пятый день развития in vitro. e.bl – ранняя бластоциста, Bl3Ab – экспандированная бластоциста, Bl5Ab – бластоциста перед хетчингом, ВКМ – внутренняя клеточная масса.

Дальнейшее развитие эмбриона происходит уже в матке после имплантации. Для успешной имплантации бластоцисте необходимо выйти из окружающей ее блестящей оболочки. Данный процесс называется вылупление, или хетчинг. В случае, когда эмбриолог отмечает изменения блестящей оболочки и после криоконсервации эмбрионов процесс самостоятельного вылупления бластоцисты может быть затруднен и его возможно облегчить применяя вспомогательный хетчинг. В нашем центре мы используем наиболее эффективный лазерный вспомогательный хетчинг.

Самая высокая частота оплодотворения получена при переносе эмбрионов на стадии бластоцисты. Так, в нашем центре она составляет 53%. В то время, как при переносе на стадии 6-8 бластомеров – 47%.

Замораживание и ПГД также лучше всего выполнять на стадии бластоцисты. Однако, не все эмбрионы доходят до бластоцисты. Поэтому общепринятым считается следующий подход: если на 5 день культивирования имеется меньше 5 эмбрионов, как минимум один переносят, остальные оставляют до 5 дня. Из достигших бластоцисты еще один может быть перенесен (двойной перенос), остальные замораживают. Если на 3 день эмбрионов 5 и больше, их не переносят и оставляют культивировать до 5 дня. На 5 день одну, реже две бластоцисты переносят, остальные замораживают.

В заключение следует отметить, что описываемые морфологические критерии оценки качества эмбрионов являются основными, необходимыми, но не всегда достаточными для выбора эмбриона для переноса. Так, нередко после переноса эмбрионов высшего качества имплантация не наступает и, наоборот, бывают случаи наступления и успешного развития беременности при переносе эмбрионов плохого качества. Поэтому существуют дополнительные способы прогноза имплантации эмбриона (time-laps, ПГС, анализ метаболитов и др.), которые дополняют морфологические критерии и обеспечивают в совокупности выбор лучшего эмбриона.

Бластоциста в процессе хетчинга (выхода из блестящей оболочки для имплантации)

А – световая микроскопия HMC контраст Б – Сканирующая электронная микроскопия - ZP – блестящая оболочка TE – трофэктодерма ВКМ – внутренняя клеточная масса

В последние годы все большую популярность набирает такой метод рождения ребенка, как искусственное оплодотворение. Положительный результат такой процедуры определяется различными факторами и соблюдением правильно подобранных методик на различных этапах цикла. Существует определенная классификация эмбрионов при ЭКО, которые в последующем будут перенесены в матку женского организма.

Особенности искусственного оплодотворения

На сегодняшний день искусственное оплодотворение является одним из способов восстановления способности женского организма к рождению ребенка. Такая методика не такая сложная, как пересадка женской половой клетки, но в то же время позволяет добиться желаемого результата.

Каким же способом может проводиться искусственное оплодотворение?

Все виды искусственного оплодотворения представляют собой довольно сложные процедуры, и на конечный результат влияет сразу несколько факторов. Именно поэтому потенциальным родителям следует набраться терпения и верить в успех.

Распространенным методом наступления у женщины беременности считается ЭКО, когда оплодотворение полученной из организма яйцеклетки проводится в искусственных условиях. В течение нескольких суток контролируют развитие эмбриона в пробирке, после чего помещают его в детородный орган женского организма для дальнейшего роста.

Классификация эмбрионов

Обычно проводится визуальная оценка качества подготовленных для переноса зародышей, а также особенности их развития. В день проведения пункции выполняется оплодотворение ооцитов и после этого специалист каждый день под микроскопом контролирует рост эмбрионов и классифицирует их с учетом определенной схемы.

Оценка качества эмбрионов осуществляется с учетом различных критериев в зависимости от времени суток.

В первые сутки после оплодотворения проводится оценка эффективности процедуры, и после этого обращается внимание на первое клеточное деление зародившегося организма. На 2 и 3 сутки начинается процесс дробления клеток эмбриона и оценивается количество бластомеров. На вторые сутки после оплодотворения их количество должно составлять 4-5, а на 3 сутки развития увеличивается до 6-8. Кроме этого, специалист обращает внимание на формы и размеры эмбрионов, а также присутствие фрагментации.

Чаще всего встречается цифро-буквенная классификаций по качеству зародышей второго — третьего дня. Она позволяет оценить степень фрагментации и количество клеток в эмбрионе. Обычно записывается число с буквой, где первый показатель отражает количество клеток в эмбрионе, а второй — процент фрагментации.

  • А — говорит о том, что фрагментация полностью отсутствует:
  • В — показатель фрагментации составляет 25%;
  • С- уровень фрагментации увеличился до 25-50%;
  • D-показатель фрагментации более 50%

Обычно зародыши с буквой D не подлежат переносу в полость детородного органа женщины и не консервируются.

Классификация бластоциста

После того, как полость внутри морулы достигает 50% ее объема, зародыш получает название бластоциста. Нормальным считается формирование бластоцисты с конца 4 до средины 6 суток, и преимущественно это происходит на пятые сутки.

Составляющими бластоцисты считаются две популяции клеток:

  • трофобласт — это однослойный эпителий, который окружает полость;
  • внутриклеточная масса, то есть плотное соединение клеток.

Основным назначением трофобласта является успешное внедрение эмбриона в эндометриальную ткань детородного органа. В последующем клетки трофобласта дают старт развитию всем не зародышевым оболочкам плодного яйца. Все ткани и органы будущего плода начинают формироваться из внутренней клеточной массы.

Потенциал зародыша к имплантации повышается в ситуации, когда выявляется большая полость бластоцисты и хорошо развита внутренняя клеточная масса и трофобласт. Внедрение бластоцисты в эндометриальную ткань детородного органа обычно приходится на 6-7 сутки развития эмбриона.

Выделяют несколько классификаций бластоцист, которые схожи между собой. При определении качества бластоцисты делается акцент на следующие показатели:

  • качество трофэктодермы;
  • размер полости;
  • качество внутриклеточной массы.

Такой метод оценки зародышей по внешнему виду вполне себя оправдывает, поскольку имеется корреляция между частотой успешного зачатия и качеством переносимых эмбрионов. На самом деле, определение качественного зародыша считается довольно сложной задачей, от которого в последующем зависит конечный результат.

Перенос эмбриона в детородный орган

Обычно практикуется помещение эмбриона в матку на 2-3 день после проведения культивирования. Выбор момента определяется интенсивностью дробления эмбрионов. Медицинская практика показывает, что при процедуре ЭКО в полость детородного органа лучше всего переносить двух зародышей только высокого качества. В том случае, если их качество вызывает некоторые сомнения, то рекомендуется подсадка сразу трех эмбрионов.

Некоторые медицинские центры практикуют перенос в детородный орган сразу четырех и даже пяти эмбрионов. Однако, в последнее время многие специалисты утверждают, что оптимальным вариантом служит помещение в матку трех зародышей. После такой процедуры подсаженные эмбрионы приживаются либо погибают. При переносе в матку большего числа эмбрионов повышаются шансы на наступление многоплодной беременности.

Подсадка зародышей в полость детородного органа выполняется после тщательно взвешенных решений специалистом с учетом их качества и количества. Используя классификацию эмбрионов, медицинские клиники выявляют именно яйцеклетку, которая может наилучшим образом внедриться в маточную полость. Именно из нее в последующем происходит развитие здорового и полноценного эмбриона. После окончания процедуры имплантации начинается процесс активного роста эмбриона внутри материнского организма.

eco-portal.ru

Оценка качества эмбрионов в программах ЭКО

А так как различные манипуляции с эмбрионом человека – это передний край современной науки, можете представить себе сложность терминологии, которую используют эмбриологи в своей повседневной деятельности.

Ясности не добавляет и обилие различных классификаций и методов оценки качества используемых клеток.

Мы постараемся доступным языком объяснить, что подразумевается под непонятными сочетаниями букв и цифр и дать понимание того, на основе каких данных врачи принимают решения и дают прогнозы на исход программ ЭКО.

Хотим сразу предупредить — ни в коем случае не стоит забывать, что для того, чтобы самостоятельно оценить перспективы и принять решение о переносе эмбриона нужно быть настоящим специалистом, имеющим помимо специального образования достаточный опыт. В каждом конкретном случае решение и прогноз основывается на совокупности всех известных данных и чаще всего является коллективным решением врача и эмбриолога.

Главная сложность состоит в том, что каждому этапу развития эмбриона соответствует своя система оценки качества и способ записи этой оценки. И для того чтобы понимать обозначения вроде «8с» необходимо хотя бы немного разобраться в содержании этих этапов и сопутствующих терминах.

На первом этапе эмбриолог оценивает признаки оплодотворения после проведенной процедуры ЭКО, ИКСИ, ИМСИ или PICSI. На этом этапе в эмбрионе оценивают наличие, количество, симметричность, внутреннее строение и внешний вид пронуклеусов.

Пронуклеусы — это ядра мужской и женской половых клеток еще не слившихся и несущих одинарный набор хромосом. По их количеству и внешнему виду оценивают жизнеспособность эмбриона и перспективы возникновения патологий.

В норме их должно быть два, они должны иметь относительно равные размеры, находиться рядом и иметь внутри «ядрышки» — пронуклеоли тоже в определенном количестве и расположенные определенным образом.

На этом этапе может формироваться множество патологий, например, при присутствии только одного пронуклеуса оплодотворение и не сможет произойти, ведь именно это образование и есть носитель генетического материала, а без участия противоположного пола размножаться мы еще не научились.

Пронуклеусов может оказаться и три. Такие эмбрионы часто несут аномальный, тройной набор хромосом и нежизнеспособны. Обычно они погибают до имплантации (прикрепления к стенке матки) или приводят к замершей беременности. Такие эмбрионы отбраковываются и не используются в программах ЭКО.

День второй

Вторые сутки знаменуются соединением ядер женской гаметы и мужской, а также процессом дробления зиготы, которая на этой стадии становится эмбрионом. Численность бластомеров (эмбриональных клеток) – 2–4, но их объем не увеличивается.

Дробление эмбрионов оценивается специалистом по таким критериям:

  • количество эмбриональных клеток;
  • форма, строение, размеры;
  • симметричность деления;
  • скорость дробления;
  • число ядер в бластомерах. В норме бластомеры одноядерные, при патологиях возникает мультинуклеация (более одного ядра), что, скорее всего, свидетельствует о хромосомном нарушении у эмбриона;
  • отклонения в цитоплазме (содержимое клетки);
  • наличие участков цитоплазмы, неимеющих ядер (фрагментация). Чем выше степень фрагментации, тем больше рисков, что эмбрион далее будет развиваться. На сегодняшний день до конца непонятно, почему происходит фрагментация, которая встречается в программах ЭКО довольно часто: является ли это следствием стимуляции или это характерная особенность эмбрионального развития.

Максимальной имплантационной способностью обладают эмбрионы с регулярной формой бластомеров, отсутствием фрагментации, нормальной скоростью деления.

Уровень фрагментации и численность бластомеров классифицируется по типам следующим образом:

  • А – высококачественный эмбрион без фрагментированных бластомеров;
  • В – среднекачественный эмбрион, фрагментация составляет менее 20%;
  • С – удовлетворительное качество эмбриона, фрагментация составляет 21–50%.

Самый качественный эмбрион — 4А, где 4 — количество бластомеров, А — отсутствие фрагментации.

День третий

Продолжается дробление эмбриона, у которого насчитывается от 4 до 9 бластомеров. В начале третьего дня развития запускается собственная генетическая программа, которая в некоторых случаях содержит «опечатки». До этого эмбрион для своего роста «пользуется» веществами, накопленными яйцеклеткой во время ее созревания.

Если эмбрион имеет мутации в программе («блок развития»), то далее он не развивается. Это происходит примерно в 20% случаях. Причиной «блока развития» может быть низкокачественная семенная жидкость или яйцеклетка. Изначальное неудовлетворительное развитие эмбриона свидетельствует о проблемах с яйцеклеткой, если эмбрион «страдает» с третьих суток культивирования, то сперма была ненадлежащего качества.

«Блок развития» – это так называемый естественный отбор, эволюционный спасительный механизм, который останавливает развитие некачественных эмбрионов. Как в дальнейшем будет развиваться и расти эмбрион зависит от сформированного генома и своевременности начала его функционирования.

День четвертый

К этому сроку эмбрион содержит до восьми бластомер. Клетки контактируют значительно активнее, поверхность у эмбриона немного сглаживается. Культивирование эмбриона третьи сутки характеризуется началом такого процесса, как компактизация, когда границы эмбриональных клеток различить невозможно. Компактизация бывает частичная или полная. Если этот процесс произошел на второй день, то возможно эмбрион развивается неправильно, с отклонениями, что отображается в эмбриологическом протоколе. Готовится переход эмбриона в бластоцисту.

В моруле (трехдневный эмбрион) содержится до 16 бластомеров. При естественном зачатии на этом сроке эмбрион транспортируется из фаллопиевых труб в матку. По окончании четвертых суток происходит кавитация, когда внутри эмбриона образуется пустота.

В процессе эмбрионального роста за пределы зародышевой оболочки выходит определенное количество клеток. Эти клетки при необходимости генетического исследования забирают на анализ.

Диагностику проводит эмбриолог на 5–6 сутки, прокалывая зародышевую оболочку. Биопсия абсолютно безопасна для эмбриона и не вредит его развитию. До получения диагностических данных эмбрионы криоконсервируют.

Результаты исследования напрямую повлияют на дальнейшую «судьбу» эмбриона, характеристики которого никак не меняются после размораживания. Современные безопасные технологии замораживания биоматериала позволили широко внедрить в различные программы ВРТ генетическую диагностику.

На четвертый день оценка эмбриона малоинформативна, но его можно оценить по численности компактизированных клеток. Чем больше таких клеток, тем вероятнее эмбрион станет бластоцистой.

Оценивание компактизации происходит по классам:

  • первый – компактизировано меньше 50% клеток;
  • второй – примерно 50%;
  • третий – 75%;
  • четвертый – 100%.

Не во всех лабораториях происходит оценка по такому критерию.

День пятый

На данном этапе, включающем период с конца четвертого до начала шестого дня, морула, полость которой составляет половину своего объема, становится бластоцистой, состоящей из двух типов клеток:

  1. Трофобласт – наружная оболочка, состоящая из однослойного эпителия, расположенная вокруг внутренней полости. Задача трофэктодермы – регуляция и контроль над имплантацией эмбриона в эндометрий, развитие плаценты и внеэмбриональных оболочек.
  2. Эмбриобласт (внутриклеточная масса) – масса служит основой для образования тканей и органов будущего ребенка.

Ооцит окружен блестящей оболочкой плотной консистенции (Zona pellucida), выполняющей две функции: она препятствует проникновению в яйцеклетку более одного спермия и удерживает вместе бластомеры.

По мере роста внутриэмбриональная полость расширяется, приводя к разрыву оболочки, в результате чего происходит выход бластоцисты или «хэтчинг» (вылупление).

На этом этапе оценка эмбриона происходит по таким критериям:

  • объем внутренней полости;
  • степень выхода за оболочку;
  • плотность трофэктодермы;
  • количество эмбриобластов.

Качество обозначается цифрами (1–5), количество — буквами (А-С).

На пятый день бластоцисты переносят в матку или замораживают.

Бластоцисты оценивают по степени зрелости (бластуляция):

  • первая степень – ранняя бластоциста с внутренней полостью меньше 50% объема эмбриона;
  • вторая – полость больше 50% объема;
  • третья – полость занимает 100% объема эмбриона;
  • четвертая – расширенная бластоциста с полостью становится больше оболочки (Zona pellucida), которая истончается;
  • пятая – проникновение трофобласта через оболочку;
  • шестая – бластоциста покинула Zona pellucida.

Оценка эмбриобласта:

Важнейший критерий внутриклеточной массы (ВКМ) – плотность, сгруппированность. Эмбрион считается более качественным, если отмечается высокая плотность ВКМ.

  • А – большое количество плотно сгруппированной внутриклеточной массы.
  • В – количество клеток и плотность средняя.
  • С – количество ВКМ незначительно.

Критерии трофэктодермы – количество и маленький размер:

  • А – многочисленные клетки трофэктодермы.
  • В – незначительная численность клеток.
  • С – большого размера клетки в небольшом количестве.

Степень приживаемости эмбрионов в полости матки оценивают спустя две недели по исследованию крови на ХГЧ. Более достоверная информация будет получена с помощью УЗ-диагностики через три недели. Вероятность наступления беременности зависит во многом от качества имплантированных эмбрионов.

Морфологические данные, используемые для оценивания эмбрионов, являются необходимыми и основными, но этого не всегда достаточно. Иногда при переносе высококачественных эмбрионов они не имплантируются. В других случаях при переносе эмбрионов невысокого качества наступает беременность. Поэтому эмбриологи используют дополнительные варианты оценивания, позволяющие спрогнозировать имплантацию.

Развитие эмбрионов является сложным трудоемким процессом, в котором нужно учитывать массу тонких нюансов, что под силу только высокопрофессиональным специалистам.

Если в ходе проведения программы ЭКО удалось довести 40% эмбрионов до этапа бластоцисты отличного качества, то программа считается успешной.

В этом плане криотехнологии, применяемые в протоколах ЭКО, неоценимы, поскольку есть возможность не только перенести в матку высококачественные эмбрионы, но и заморозить оставшиеся. Это преимущество позволяет использовать криозамороженный биоматериал при следующем переносе, минуя несколько небезопасных для здоровья и дорогостоящих этапов.

altravita-ivf.ru


Смотрите также